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1、仪器分析,总结,一、绪论,1. 仪器分析的概念和主要分析方法 2. 分析仪器的主要性能指标 误差、系统误差、偶然误差；偏差；准确度、精密度、精确度；灵敏度、噪声、最小检测量、噪声的表现形式；线性范围；选择性、分辨率。,二、色谱分析法,色谱法概论 气相色谱法 高效液相色谱法 超临界色谱法 氨基酸自动分析仪,色谱法概论,1 什么是色谱法？色谱法的分类 2 色谱图及其重要参数 色谱流出曲线说明的信息 保留值，峰高，峰面积，峰宽； 容量因子（分配比） 分配系数,K= Cs/Cm,相对保留值,3 色谱法基本理论 1）塔般理论 解释了色谱流出曲线的形状和浓度极大值对应的tR 阐明了保留值与K的关系 评价柱
2、效（n，）,塔板理论的特点，成功处与失败处,2）速率理论 H= A + B/U + CU H-U曲线及影响因素 如何提高色谱分离效率,判断色谱分离效果计算分离度,3）总分离效能指标色谱分离基本方程：,气相色谱法,1、 气相色谱仪 载气系统 载气净化 进样系统 六通阀 分离系统 ：毛细管色谱柱和填充柱 检测器 :TCD,FID 温控系统: 三温,2.气相色谱操作条件的选择,1). 色谱柱的选择及对色谱分离的影响 固定相选择的基本原则 “相似相溶” 选择与试样性质相近的固定相;差异选择 2)柱温的选择：程序升温 3)载气与流速的选择 4)进样条件的选择,3 气相色谱的定性分析 保留值 相对保留值
3、保留指数 与质谱红外等其它仪器连用 4 定量分析 峰面积 定量校正因子 外标法 内标法,高效液相色谱法,1 高效液相色谱法的特点 高效液相色谱与经典液相色谱的区别 高效液相色谱与气相色谱的区别 高效液相色谱的类型 2 原理 H=A + CU（同气相色谱比较） H-U 曲线 影响色谱分离的因素,4 高效液相色谱仪 输液系统 梯度洗脱 进样系统 分离系统 检测系统 记录系统,5.高效液相色谱的固定相和流动相,1）固定相的种类和选择 2）流动相的组成和选择（与气相色谱比较） 流动相的极性 梯度洗脱,6.正相色谱和反相色谱的区别及选择 7.液相制备色谱的方法,氨基酸自动分析仪,实质是一台专用离子交
4、换型高效液相色谱仪 1 固定相： 强酸性阳离子交换树脂 流动相 ： 缓冲液 2 原理： 离子交换过程 3 检测： 560nm 440nm 4 试样处理方法： 酸处理 碱处理 酶处理 5 仪器结构（同普通高效液相色谱仪比较）,三、原子吸收分光光度法,1.光与物质的相互作用 吸收光谱 发射光谱 荧光光谱 拉曼光谱 原子光谱 分子光谱,2. 原子吸收分光光度法原理 1）谱线轮廓 吸收线）谱线变宽 自然变宽 多普勒变宽 压力变宽 3）原子吸收测量 峰值吸收 A = k N0 L 锐线光源（半宽度、中心频率）,3.原子吸收分光光度计 1) 光源：空心阴极灯的作用、原理及电流选择 2) 原子化
5、系统 火焰原子化系统 无火焰原子化系统 3) 光学系统 单色器 组成 作用 表征光栅性能的指标：线色散率 倒线色散率 光谱通带 W=DS 4) 检测系统,4. 干扰及其抑制 光谱干扰 化学干扰 物理干扰,5. 测量条件的选择 分析线的选择 灯电流 火焰温度 燃烧器高度 狭缝宽度,6. 定量分析方法 灵敏度：S=C.0.0044/A 检出极限：D=C.3 /A 标准曲线法 标准加入法 Cx=Ax/(A0Ax).C0,7. 试样处理 干法灰化 湿法消化,8.原子吸收分光光度法与原子荧光法比较,四、电位分析法,1.电位法测定溶液中的pH值 玻璃电极 酸度计测定原理 标准pH缓冲溶液，不对称电位，液接电位，钠差， 酸差,2.离子选择性电极 氟电极，钙电极，氨电极，酶电极 3.离子选择性电极测定的影响因素 温度，pH，干扰离子，响应时间 ，总离子强度调节缓冲溶液（TISAB）的作用， 电动势测量误差 4.电极的选择性系数K i，j 5.离子选择性电极的测量方法 标准曲线法，标准加入法,
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